Cómo hacer placas de agar
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Las placas de Petri y el agar son componentes esenciales de la técnica de placas de cultivo desarrollada por Robert Koch. Esta técnica microbiológica le permitió a él y a otros biólogos posteriores aislar, cultivar y estudiar microorganismos en laboratorios para avanzar en el conocimiento de la bacteriología, la micología, las enfermedades infecciosas, la epidemiología, la ciencia de los alimentos y la biotecnología[1].
El agar es un tipo de polisacárido natural aislado de algas rojas. Se mezcla con un medio de cultivo líquido, que se calienta, se funde y se solidifica en un medio sólido. El agar se utilizó por primera vez en el siglo XIX para sustituir a la gelatina, el primer agente gelificante. A diferencia de la gelatina, el agar tiene una temperatura de fusión más alta, de unos 85 °C, y empieza a solidificarse cuando la temperatura desciende hasta los 42 °C. El agar es firme y permanece sólido si se calienta con un medio de cultivo líquido. El agar solidificado no se pega y es transparente, lo que permite a los usuarios observar e identificar las colonias microbianas que crecen en el medio sólido. Además, los microorganismos, como los patógenos humanos infecciosos, las bacterias, las levaduras y los hongos, no pueden metabolizar el agar solidificado. Como resultado, el agar permanece sólido y no se desintegra cuando los microbios crecen y expanden sus colonias[1,2].
Medios de cultivo bacterianos
Las placas de Petri y el agar son componentes esenciales de la técnica de placas de cultivo desarrollada por Robert Koch. Esta técnica microbiológica le permitió a él y a otros biólogos posteriores aislar, cultivar y estudiar microorganismos en laboratorios para avanzar en el conocimiento de la bacteriología, la micología, las enfermedades infecciosas, la epidemiología, la ciencia de los alimentos y la biotecnología[1].
El agar es un tipo de polisacárido natural aislado de algas rojas. Se mezcla con un medio de cultivo líquido, que se calienta, se funde y se solidifica en un medio sólido. El agar se utilizó por primera vez en el siglo XIX para sustituir a la gelatina, el primer agente gelificante. A diferencia de la gelatina, el agar tiene una temperatura de fusión más alta, de unos 85 °C, y empieza a solidificarse cuando la temperatura desciende hasta los 42 °C. El agar es firme y permanece sólido si se calienta con un medio de cultivo líquido. El agar solidificado no se pega y es transparente, lo que permite a los usuarios observar e identificar las colonias microbianas que crecen en el medio sólido. Además, los microorganismos, como los patógenos humanos infecciosos, las bacterias, las levaduras y los hongos, no pueden metabolizar el agar solidificado. Como resultado, el agar permanece sólido y no se desintegra cuando los microbios crecen y expanden sus colonias[1,2].
Agar para recuento en placa
Colóquelo en el microondas durante 30 segundos a temperatura normal. Manténgase de pie y vigile que no hierva. Una vez que todos los medios AGAR se haya disuelto en una solución teñida, normalmente 2-3 minutos, que haya terminado y dejar enfriar hasta que sea seguro tocar.
Mientras esperas a que el medio se enfríe, despeja la encimera o la mesa y apila las placas en columnas de 3 a 5, dependiendo de lo que te resulte más cómodo (practica agarrando la tapa de la placa inferior más vacía y levantándola junto con todas las placas de encima).
Listo para servir. Vuelve a la técnica que has practicado. Agarra la tapa de la placa que está más abajo y levanta todas las placas. A continuación, vierte el agar LB hasta que cubra el fondo. A continuación, agarre la tapa de la siguiente placa sin rellenar de la pila y llénela.
Dejar enfriar y solidificar durante unas horas o toda la noche sobre una mesa o encimera si es posible. Esto permite que parte de la condensación vuelva a salir antes de guardarlos a 4C en el frigorífico. Guárdelos boca abajo para que la condensación no gotee sobre el plato.
Agar inclinado
Consulte la tarjeta de recetas 1 de CLEAPSS para obtener todos los detalles sobre la manipulación del agar. El riesgo identificado está relacionado con la inhalación del polvo al preparar la gelatina de agar; la medida de control consiste en pesar el polvo en una vitrina de gases. El riesgo de quemaduras al manipular líquido caliente se reduce utilizando guantes de cocina.
1 Agar básico Mezclar 1,5 g de agar con 10 cm3 de agua hasta obtener una pasta. Añadir lentamente más agua removiendo hasta que el volumen sea de 100 cm3. Calentar la mezcla en un baño de agua hirviendo hasta 95 °C en el recipiente deseado. Este calentamiento previo puede omitirse si el agar se va a esterilizar a continuación, a menos que sea necesario decantar el agar en recipientes más pequeños antes de esterilizarlo en autoclave.
2 Agar nutritivo para bacterias Mezclar 2 g de Bovril, 0,5 g de cloruro sódico y 1,5 g de agar con 10 cm3 de agua hasta formar una pasta. Añadir lentamente más agua sin dejar de remover hasta que el volumen sea de 100 cm3. Calentar en un baño de agua hirviendo a 95 °C en el recipiente deseado.
3 Agar malta para hongos Mezclar 2 g de extracto de malta con 2 g de agar con 10 cm3 de agua hasta formar una pasta. Añadir lentamente más agua con agitación hasta que el volumen sea de 100 cm3. Calentar en un baño de agua hirviendo a 95 °C en el recipiente requerido.
